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CONTEÚDO

Coccidiose: Avanços e perspectivas no diagnóstico molecular de Eimeria spp.

A Coccidiose aviária é uma das doenças mais importantes que acometem frangos de corte. É responsável por causar significativos impactos econômicas na atividade devido ao fato de afetar a taxa de crescimento, diminuir a eficiência alimentar e aumentar a mortalidade nas aves acometidas. Recentes análises financeiras dos impactos econômicos decorrentes da coccidiose indicam que despesas globais relacionadas à prevenção e controle da doença, tratamento das aves doentes e prejuízos nos índices zootécnicos podem chegar a casa de bilhões de reais de perdas anuais.

 

O que é a coccidiose aviária?

A coccidiose é uma doença parasitária causada por protozoários do gênero Eimeria, os quais são altamente contagiosos e infestam o trato gastrointestinal das aves causando lesões na mucosa intestinal, inflamação e hemorragia. Existem várias espécies de Eimeria que podem acometer frangos de corte, das nove capazes de infectar galinhas as mais comuns são: E. acervulina, E. maxima, E. tenella e E. necatrix. Já em perus, das sete espécies existentes, apenas quatro apresentam potencial patogênico: E. adenoeides, E. meleagrimitis, E. gallopavonis e E. dispersa. Cada espécie tem suas próprias características patogênicas e pode causar danos específicos ao trato gastrointestinal das aves (BACK, 2019).

É fundamental destacar que as coccídias apresentam alta especificidade em relação ao hospedeiro e não ocorre o desenvolvimento de imunidade cruzada entre as distintas espécies de Eimeria. É comum observar infecções simultâneas por múltiplas espécies, sendo que cada uma delas demonstra preferência por parasitar uma região específica do trato intestinal das aves (BACK, 2019).

 

Diagnóstico

O uso de contagem de ovos por grama (OPG) é uma ferramenta comum para o diagnóstico de infecções por Eimeria spp. na avicultura. A contagem de OPG envolve a coleta de amostras de fezes das aves e a subsequente contagem dos ovos de Eimeria presentes nessas amostras. Essa contagem pode ser feita direta sob um microscópio ou utilizando técnicas de flutuação em soluções específicas para concentrar os ovos antes da contagem.

Embora a OPG seja uma técnica amplamente utilizado, ela apresenta algumas limitações. Por exemplo, não diferencia as espécies de Eimeria presentes nas amostras fecais, o que pode ser crucial para determinar o curso adequado de tratamento. Além disso, a sensibilidade e precisão da contagem de OPG podem variar, levando a resultados inconsistentes entre diferentes laboratórios ou operadores. O processo de contagem de OPG também pode ser demorado e requer mão de obra qualificada, aumentando os custos e o tempo necessários para obter resultados. Outra limitação é a incapacidade do OPG de detectar infecções leves ou recentes de Eimeria spp., podendo resultar em subestimação da prevalência real da infecção. Além disso, fatores externos, como a presença de outros materiais fecais ou ovos de outros parasitas, podem interferir na precisão dos resultados da contagem de OPG.

Contudo, outras abordagens como testes sorológicos e a PCR (Reação em Cadeia da Polimerase) também podem ser empregadas para complementar o diagnóstico.  Para detecção e monitoramento preciso das infecções por Eimeria spp. em aves de produção a PCR em Tempo Real (qPCR), têm surgido como uma opção rápida e precisa. A qPCR permite a detecção específica e sensível do DNA das diferentes espécies de Eimeria presentes nas amostras fecais das aves, fornecendo resultados rápidos e confiáveis. Além disso, essa técnica pode ser usada para monitorar a carga parasitária ao longo do tempo, avaliar a eficácia de programas de controle e prevenção, e ajudar na tomada de decisões para melhorar a saúde e o desempenho das aves.

 

O uso de técnicas moléculas no diagnóstico de Eimeria spp.

Embora os resultados sejam preliminares, e o uso da qPCR para quantificação de coccídeas ainda careça de mais padronizações, estudos recentes destacam a capacidade da qPCR de fornecer resultados quantitativos bastante precisos, permitindo uma análise detalhada da carga parasitária de Eimeria spp. nas aves.

Nolan et al. (2015) demonstraram uma correlação significativa entre os resultados do teste quantitativo de qPCR e a carga parasitária de Eimeria por OPG em amostras de frangos de corte, destacando um aumento dependente da dose na contagem de parasitas em relação ao tempo pós-infecção. Além disso, o estudo ressaltou a capacidade da qPCR de superar as limitações subjetivas da quantificação coproscópica, proporcionando uma avaliação reprodutível e de alta capacidade de processamento de amostras em um menor tempo.

Kundu et al. (2020) complementaram esses achados, destacando a ocorrência e distribuição de diferentes espécies de Eimeria em unidades de criação de frangos de corte, aves de postura e aves de subsistência. Os resultados revelaram uma prevalência significativa de E. necatrix, E. maxima e E. acervulina, com E. necatrix apresentando a maior carga parasitária, seguida por E. acervulina e E. maxima. A análise quantitativa das amostras utilizando qPCR permitiu uma caracterização detalhada da infecção por Eimeria em diferentes unidades de criação, fornecendo insights valiosos sobre a distribuição e gravidade das infecções.

Os dados de monitoramento de Eimeria por qPCR realizados pelo MercoLab revelam uma incidência significativa deste patógeno em amostras provenientes do monitoramento de 20 lotes de frango de corte. Neste estudo, 30% das amostras analisadas positivas para pelo menos uma espécie. Esses resultados, embora limitados em tamanho amostral, apontam para uma maior prevalência de E. acervulina (30%), seguida de E. maxima (15%) e E. tenella (5%). As amostras testadas incluíram tanto amostras de fezes quanto suabes de cloaca, com resultados consistentes em ambas as fontes. Notavelmente, os dados sugerem que o suabe de cloaca emerge como um método eficaz no monitoramento dessas espécies de Eimeria por qPCR, fornecendo uma abordagem alternativa e potencialmente sensível para a detecção desses parasitas em aves de produção.

Em resumo, em frangos de corte a coccidiose ainda representa um desafio significativo para a indústria avícola, com impactos financeiros substanciais. O uso de técnicas moleculares como a qPCR é uma ferramenta valiosa para a detecção, monitoramento e diagnóstico eficaz de infecções por Eimeria spp., permitindo uma abordagem mais precisa e eficiente para o controle dessa doença parasitária. A qPCR emerge como uma ferramenta que pode ajudar a melhorar a compreensão dos padrões de infecção e facilitar a implementação de estratégias de controle eficazes.

Hoje, o MercoLab conta tanto com a análise microscópica para contagem dos oocistos (OPG) como com a detecção e diferenciação molecular das espécies de Eimeria (E. acervulina, E. maxima, E. tenella) por PCR em Tempo Real.

 

Referências

BACK, A. Manual de doenças das aves. Capítulo 4 – Doenças Parasitárias, Coccidiose – 70, página 269. 3ª Edição, Editora Integração. 2019.

Nolan, M. J., Tomley, F. M., Kaiser, P., & Blake, D. P. (2015). Quantitative real-time PCR (qPCR) for Eimeria tenella replication — Implications for experimental refinement and animal welfare. Parasitology International, 64(5), 464–470. doi:10.1016/j.parint.2015.06.010

Kundu, K., Kumar, S., Banerjee, P. S., & Garg, R. (2020). Quantification of Eimeria necatrix, E. acervulina and E. maxima genomes in commercial chicken farms by quantitative real time PCR. Journal of Parasitic Diseases. doi:10.1007/s12639-019-01188-2

 

Autor:

Jorge A. P. Marchesi

Biólogo, Msc, PhD em Genética e Biologia Molecular

Biologista Molecular no MercoLab

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